BPC-157 : structure, analytique et manipulation dans la recherche

Présentation et dénomination

BPC-157 est l’abréviation établie d’un peptide de synthèse de 15 acides aminés. Les lettres renvoient au nom historique « Body Protection Compound » employé dans la littérature ; ce nom est une désignation et n’affirme rien sur les propriétés du réactif. Le nombre 157 fait lui aussi uniquement partie du nom et n’indique ni la longueur de chaîne ni la masse. Les graphies BPC 157 ou BPC157 désignent le même pentadécapeptide.

Dans le catalogue de GPeptides, le nom apparaît dans deux produits :

• BPC-157 : le peptide seul, sous forme de lyophilisat, à 5 mg par flacon.
• BPC-157 + TB500 : un blend dans lequel le BPC-157 et le TB-500, fragment de la thymosine β4, sont conditionnés ensemble ; la mention 10 mg couvre les deux peptides.

Ce qui fait foi pour l’identité n’est pas le nom commercial, mais l’ensemble formé par la séquence, le numéro CAS 137525-51-0 et le résultat de la spectrométrie de masse.

Structure en détail

La séquence GEPPPGKPADDAGLV se divise en trois segments :

1. Positions 1–8 (GEPPPGKP) : une région riche en proline. Le cycle latéral de la proline, relié à l’azote du squelette, rigidifie la chaîne. La lysine en position 7 fournit la seule chaîne latérale basique.
2. Positions 9–12 (ADDA) : deux aspartates voisins, encadrés par des alanines ; c’est le segment le plus sensible pour l’analytique et le stockage.
3. Positions 13–15 (GLV) : une courte terminaison, relativement hydrophobe.

Par le calcul, la molécule porte à pH neutre une charge nette d’environ −2 ; le point isoélectrique se situe dans la zone acide. Ce qui manque est tout aussi instructif : le BPC-157 n’est ni acétylé ni amidé, ni cyclisé, et ne contient ni pont disulfure, ni chaîne lipidique, ni complexe métallique. Une variante acétylée en N-terminal serait plus lourde de 42,01 Da, une variante amidée en C-terminal plus légère de 0,98 Da ; toutes deux se distingueraient par spectrométrie de masse. Manquent en outre la méthionine, la cystéine et le tryptophane, c’est-à-dire les chaînes latérales classiquement sensibles à l’oxydation, ainsi que l’asparagine et la glutamine, sujettes à la désamidation.

Distinction avec les fragments apparentés

La comparaison avec les autres fragments de la catégorie et avec la protéine mère du TB-500 fait apparaître des différences nettes de longueur, de groupes terminaux et d’origine :

• BPC-157 : 15 acides aminés, extrémités libres, C62H98N16O22, 1419,5 g/mol ; séquence rattachée à une protéine décrite dans le suc gastrique.
• TB-500 : 7 acides aminés (Ac-LKKTETQ), acétylé en N-terminal, C38H68N10O14, 889,0 g/mol ; segment 17–23 de la thymosine β4.
• Thymosine β4 : la protéine mère complète, de 43 acides aminés et d’environ 4963 g/mol ; à ne pas confondre avec le TB-500.
• KPV : tripeptide Lys-Pro-Val à extrémités libres, 342,4 g/mol ; segment 11–13 de l’α-MSH.

Leur seul point commun est leur origine : chacun est une séquence partielle d’une protéine plus grande ; il n’existe aucune parenté de séquence.

Points d’attention pour l’analytique et le COA

La référence est la masse monoisotopique du peptide libre, soit 1418,70 Da ; lorsqu’un certificat indique une masse déconvoluée, il peut aussi s’agir, selon l’appareil, de la masse moyenne d’environ 1419,5 Da. En ionisation par électronébulisation, les signaux plausibles sont :

• Ions protonés : [M+H]+ à m/z 1419,71 et [M+2H]2+ à m/z 710,36.
• Adduits : [M+Na]+ à m/z 1441,69 et [M+K]+ à m/z 1457,67. Ils se forment lors de l’ionisation et ne constituent pas une impureté.
• Séquences de délétion : variantes de synthèse auxquelles il manque un acide aminé ; plus légères d’environ 97 Da sans une proline, d’environ 57 Da sans une glycine.
• Aspartimide et isoaspartate : au niveau des aspartates, un cycle succinimide peut se former par perte d’eau, reconnaissable à un signal situé 18 Da sous la masse cible. Si le cycle s’ouvre, il se forme des variantes isoaspartate de même masse, qui ne se remarquent en chromatographie que sous forme de pic secondaire.

Comme le BPC-157 ne contient aucun acide aminé aromatique, il n’absorbe pratiquement pas à 280 nm ; la pureté est déterminée par l’absorption de la liaison peptidique, entre 210 et 220 nm. Les quatre liaisons précédant une proline peuvent, par une isomérisation cis-trans lente, provoquer des pics élargis ou des épaulements ; seul le couplage LC-MS permet de savoir si un signal secondaire est un isomère ou une substance étrangère.

Les contre-ions s’associent aux deux groupes basiques, l’extrémité N-terminale et la lysine. Deux ions trifluoroacétate augmentent la masse formulaire, par le calcul, d’environ 228 g/mol, deux ions acétate d’environ 120 g/mol. La pureté chromatographique n’en est pas affectée, mais la teneur nette en peptide diminue. Pour le blend, deux pics principaux sont attendus, pour l’heptapeptide TB-500 par exemple [M+H]+ à m/z 889,50. Comme les deux peptides diffèrent par le nombre de liaisons peptidiques par milligramme, le rapport des surfaces des pics ne correspond pas directement au rapport des quantités.

Les deux produits sont contrôlés régulièrement en externe par HPLC et spectrométrie de masse. Les certificats d’analyse (COA) disponibles sont publiés dans l’espace laboratoire ; tant qu’aucun certificat n’est disponible pour un produit, celui-ci y est marqué « en attente ». Les guides HPLC et spectrométrie de masse et Pureté des peptides de recherche apportent le contexte nécessaire.

Stockage et manipulation au laboratoire

Le lyophilisat se conserve au sec, à l’abri de la lumière et au froid, à −20 °C ou moins pour des durées prolongées. Comme l’oxydation et la désamidation ne jouent pratiquement aucun rôle pour cette séquence, l’humidité et la chaleur sont les facteurs déterminants : toutes deux accélèrent l’hydrolyse et les réarrangements au niveau des aspartates. Laissez un flacon réfrigéré revenir à température ambiante, fermé, avant de l’ouvrir ; ainsi, aucune condensation ne se dépose. En solution, ces voies de dégradation sont nettement plus rapides ; il faut éviter les congélations et décongélations répétées. Dans le blend, le TB-500 apporte en outre, avec sa glutamine C-terminale, une chaîne latérale qui peut se désamider lentement en solution (+0,98 Da). Les principes généraux figurent dans le guide Stocker des peptides lyophilisés.

Contexte de recherche

Contrairement aux analogues hormonaux, on ne connaît à ce jour pour le BPC-157 aucun récepteur sur lequel orienter des séries d’essais. Il est étudié dans des systèmes in vitro, par exemple des cultures de fibroblastes, et dans des modèles précliniques, principalement au sujet des voies de signalisation de la migration cellulaire et de l’angiogenèse.

Usage réservé à la recherche : mention légale

GPeptides met le BPC-157 et le blend sur le marché exclusivement comme réactifs de laboratoire destinés à la recherche in vitro. Ils ne sont pas destinés à une application sur ou dans le corps humain ou animal et ne sont pas proposés comme médicaments. GPeptides ne donne aucune information sur une application ou un effet ; l’analytique atteste uniquement l’identité et la pureté du réactif. Les prix figurent sur les fiches produit BPC-157 et BPC-157 + TB500, les peptides apparentés dans la catégorie Fragments peptidiques.